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磁珠法線粒體基因組DNA小量提取試劑盒(動物)
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試劑盒簡介:
本試劑盒分為兩個部分,第一部分通過梯度離心快速收集高純度動物組織及細(xì)胞線粒體,第二部分利用硅羥基磁珠特異吸附核酸原理有效提取線粒體DNA。 廣泛地應(yīng)用于動物組織及細(xì)胞培養(yǎng)物。
提取過程中不需要苯酚及氯仿等有毒試劑,得到的DNA可以直接用于PCR、Southern blotting等下游試驗。
實驗流程圖(資源處可下載):

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常見問題
一:(DNA)植物樣本處理量不確定問題的解決方案
對于植物樣本,樣本處理量無法統(tǒng)一確定,對于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹等),建議初始樣本量不超過50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;
二:(DNA)如何處理短時間內(nèi)無法低溫處理的DNA樣本?
對于植物樣本,如果短時間不能低溫處理,建議使用硅膠顆粒干燥樣本,防止DNA嚴(yán)重降解;研磨處理材料過程中盡量不要過量,否則會導(dǎo)致DNA產(chǎn)量低;材料過量也會使樣本出現(xiàn)團(tuán)塊無法裂解,導(dǎo)致離心柱堵塞,無法獲得高質(zhì)量DNA;
三:DNA提取中A260/280比值波動是什么原因
對于基因組DNA提取,A260/280值如果低于1.7說明有可能存在蛋白污染,如果值大于1.9,說明可能存在RNA污染;如果洗脫樣本時沒有使用Buffer EB,而使用ddH20,比值或偏低,因為Ph值會影響吸光值,并不表示樣本純度低;
四:(DNA)離心柱漂洗完成后需要注意什么
離心柱漂洗完成后,盡可能烘干柱膜上殘留乙醇,殘留乙醇會影響洗脫效率和下游實驗效果;如果A260/230值過低,說明樣本提取過程中,漂洗不徹底,有鹽離子殘留,建議增加漂洗次數(shù);
五:(DNA)試劑盒中Buffer EB含微量EDTA怎樣處理
試劑盒中Buffer EB中含有少量EDTA,可能影響下游實驗,使用時適當(dāng)稀釋,如果用其他洗脫液洗脫,要確保PH>7.5,PH過低影響洗脫效率。
六:(DNA)基因組DNA樣本儲存需要注意什么
待提取樣本盡量避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段降解或者DNA得率嚴(yán)重下降。
七:血液樣本DNA提取注意事項
對于血液樣本,最好使用新鮮血液樣本或者4℃存放少于2天的樣本,否則會嚴(yán)重降低DNA產(chǎn)量;盡量避免反復(fù)凍融(不超過3-5次),每一次凍融都會降低DNA得率;
如果樣本中含有血塊,說明樣本收集時未加入血液抗凝劑;建議重新收集樣本并加入EDTA,肝素,檸檬酸等抗凝;在使用紅細(xì)胞裂解液處理血液時,確保血液樣本已經(jīng)恢復(fù)到室溫狀態(tài);處理過程中盡可能混勻樣本,防止紅細(xì)胞裂解不完全;
八:植物樣本DNA提取注意事項(一)
對于植物樣本,樣本處理量無法統(tǒng)一確定,對于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹等),建議初始樣本量不超過50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;
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