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動(dòng)物組織/細(xì)胞組織樣本DNA提取試劑盒

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庫(kù)存

397

資 源

01

動(dòng)物組織/細(xì)胞組織基因組DNA提取說(shuō)明書(shū)

文件大小:

215K

常見(jiàn)問(wèn)題

一:(DNA)植物樣本處理量不確定問(wèn)題的解決方案

對(duì)于植物樣本,樣本處理量無(wú)法統(tǒng)一確定,對(duì)于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過(guò)100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對(duì)于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹(shù)等),建議初始樣本量不超過(guò)50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;

二:(DNA)如何處理短時(shí)間內(nèi)無(wú)法低溫處理的DNA樣本?

對(duì)于植物樣本,如果短時(shí)間不能低溫處理,建議使用硅膠顆粒干燥樣本,防止DNA嚴(yán)重降解;研磨處理材料過(guò)程中盡量不要過(guò)量,否則會(huì)導(dǎo)致DNA產(chǎn)量低;材料過(guò)量也會(huì)使樣本出現(xiàn)團(tuán)塊無(wú)法裂解,導(dǎo)致離心柱堵塞,無(wú)法獲得高質(zhì)量DNA;

三:DNA提取中A260/280比值波動(dòng)是什么原因

對(duì)于基因組DNA提取,A260/280值如果低于1.7說(shuō)明有可能存在蛋白污染,如果值大于1.9,說(shuō)明可能存在RNA污染;如果洗脫樣本時(shí)沒(méi)有使用Buffer EB,而使用ddH20,比值或偏低,因?yàn)?/strong>Ph值會(huì)影響吸光值,并不表示樣本純度低;

四:(DNA)離心柱漂洗完成后需要注意什么

離心柱漂洗完成后,盡可能烘干柱膜上殘留乙醇,殘留乙醇會(huì)影響洗脫效率和下游實(shí)驗(yàn)效果;如果A260/230值過(guò)低,說(shuō)明樣本提取過(guò)程中,漂洗不徹底,有鹽離子殘留,建議增加漂洗次數(shù);

五:(DNA)試劑盒中Buffer EB含微量EDTA怎樣處理

試劑盒中Buffer EB中含有少量EDTA,可能影響下游實(shí)驗(yàn),使用時(shí)適當(dāng)稀釋?zhuān)绻闷渌疵撘合疵摚_保PH>7.5PH過(guò)低影響洗脫效率。

六:(DNA)基因組DNA樣本儲(chǔ)存需要注意什么

待提取樣本盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段降解或者DNA得率嚴(yán)重下降。

七:血液樣本DNA提取注意事項(xiàng)

對(duì)于血液樣本,最好使用新鮮血液樣本或者4℃存放少于2天的樣本,否則會(huì)嚴(yán)重降低DNA產(chǎn)量;盡量避免反復(fù)凍融(不超過(guò)3-5次),每一次凍融都會(huì)降低DNA得率;

如果樣本中含有血塊,說(shuō)明樣本收集時(shí)未加入血液抗凝劑;建議重新收集樣本并加入EDTA,肝素,檸檬酸等抗凝;在使用紅細(xì)胞裂解液處理血液時(shí),確保血液樣本已經(jīng)恢復(fù)到室溫狀態(tài);處理過(guò)程中盡可能混勻樣本,防止紅細(xì)胞裂解不完全;

八:植物樣本DNA提取注意事項(xiàng)(一)

  對(duì)于植物樣本,樣本處理量無(wú)法統(tǒng)一確定,對(duì)于一般樣本(煙草,擬南芥等),提取量不超過(guò)100mg鮮重組織或者20mg干重組織,對(duì)于復(fù)雜樣本(水稻,玉米,榆樹(shù)等),建議初始樣本量不超過(guò)50mg鮮重或者10mg干重組織;如果需要較高的DNA量,可以采取多管濃縮的方法提取DNA;

       

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